米诺环素（Minocycline）的EP全套杂质有哪些？

本次解析基于欧洲药典（EP 11.0）米诺环素盐酸二水合物专论，专论共收载9个杂质，其中指定杂质（Specified impurities）7个，可检出非指定杂质（Other detectable impurities）2个，有关物质检测采用反相高效液相色谱（HPLC）法，试验需避光操作，供试品溶液需2-8℃保存并在配制后3小时内使用。

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杂质A

• 官方名称：Minocycline Hydrochloride Dihydrate EP Impurity A
• 化学名：(4R,4aS,5aR,12aS)-4,7-bis(dimethylamino)-3,10,12,12a-tetrahydroxy-1,11-dioxo-1,4,4a,5,5a,6,11,12a- octahydrotetracene-2-carboxamide
• CAS：43168-51-0
• SMILES：[H][C@@]12CC3=C(N(C)C)C=CC(O)=C3C(=O)C1=C(O)[C@]1(O)C(=O)C(C(N)=O)=C(O)C@(N(C)C)[C@]1([H])C2
• EP官方CRS：有
• CATO货号：C4X-169922

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杂质B

• 官方名称：Minocycline Hydrochloride Dihydrate EP Impurity B
• 化学名：(4S,4aS,5aR,12aS)-4-(dimethylamino)-3,10,12,12a-tetrahydroxy-1,11-dioxo-1,4,4a,5,5a,6,11,12a- octahydrotetracene-2-carboxamide
• CAS：6625-20-3
• SMILES：[H][C@@]12CC3=CC=CC(O)=C3C(=O)C1=C(O)[C@]1(O)C(=O)C(C(N)=O)=C(O)C@@(N(C)C)[C@]1([H])C2
• EP官方CRS：有
• CATO货号：C4X-16992

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杂质C

• 官方名称：Minocycline Hydrochloride Dihydrate EP Impurity C
• 化学名：(4S,4aS,5aR,12aS)-4-(dimethylamino)-3,10,12,12a-tetrahydroxy-7-(methylamino)-1,11-dioxo- 1,4,4a,5,5a,6,11,12a-octahydrotetracene-2-carboxamide
• CAS：4708-96-7
• SMILES：[H][C@@]12CC3=C(C(=O)C1=C(O)[C@]1(O)C(=O)C(C(N)=O)=C(O)C@@(N(C)C)[C@]1([H])C2)C(O)=CC=C3NC
• EP官方CRS：有
• CATO货号：C4X-16993

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杂质D

• 官方名称：Minocycline Hydrochloride Dihydrate EP Impurity D
• 化学名：(4S,4aS,5aR,12aS)-7-amino-4-(dimethylamino)-3,10,12,12a-tetrahydroxy-1,11-dioxo-1,4,4a,5,5a,6,11,12a- octahydrotetracene-2-carboxamide
• CAS：95940-02-6
• SMILES：[H][C@@]12CC3=C(N)C=CC(O)=C3C(=O)C1=C(O)[C@]1(O)C(=O)C(C(N)=O)=C(O)C@@(N(C)C)[C@]1([H])C2
• EP官方CRS：无
• CATO货号：C4X-169938

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杂质I

• 官方名称：Minocycline Hydrochloride Dihydrate EP Impurity I
• 化学名：(4S,4aS,5aR,12aS)-9-amino-4-(dimethylamino)- 3,10,12,12a-tetrahydroxy-1,11-dioxo-1,4,4a,5,5a,6,11,12a- octahydrotetracene-2-carboxamide
• CAS：5874-95-3
• SMILES：[H][C@@]12CC3=CC=C(N)C(O)=C3C(=O)C1=C(O)[C@]1(O)C(=O)C(C(N)=O)=C(O)C@@(N(C)C)[C@]1([H])C2
• EP官方CRS：无
• CATO货号：C4X-169910

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杂质E

• 官方名称：Minocycline Hydrochloride Dihydrate EP Impurity E
• 化学名：(4S,4aS,5aR,12aS)-4,7-bis(dimethylamino)-3,10,12a-trihydroxy-12-imino-1,11-dioxo- 1,4,4a,5,5a,6,11,11a,12,12a-decahydrotetracene-2- carboxamide
• CAS：864073-42-7
• SMILES：[H][C@@]12CC3=C(N(C)C)C=CC(O)=C3C(=O)C1C(=N)[C@]1(O)C(=O)C(C(N)=O)=C(O)C@@(N(C)C)[C@]1([H])C2
• EP官方CRS：有
• CATO货号：C4X-169911

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杂质F

• 官方名称：Minocycline Hydrochloride Dihydrate EP Impurity F
• 化学名：(4S,4aS,5aR,12aS)-4,7-bis(dimethylamino)-3,10,12,12a-tetrahydroxy-N-(hydroxymethyl)-1,11-dioxo- 1,4,4a,5,5a,6,11,12a-octahydrotetracene-2-carboxamide
• CAS：1075240-33-3
• SMILES：[H][C@@]12CC3=C(N(C)C)C=CC(O)=C3C(=O)C1=C(O)[C@]1(O)C(=O)C(C(=O)NCO)=C(O)C@@(N(C)C)[C@]1([H])C2
• EP官方CRS：有
• CATO货号：C4X-16999

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杂质G

• 官方名称：Minocycline Hydrochloride Dihydrate EP Impurity G
• 化学名：(4S,4aS,5aR,12aS)-4,7,9-tris(dimethylamino)-3,10,12,12a-tetrahydroxy-1,11-dioxo-1,4,4a,5,5a,6,11,12a- octahydrotetracene-2-carboxamide
• CAS：601455-95-2
• SMILES：[H][C@@]12CC3=C(N(C)C)C=C(N(C)C)C(O)=C3C(=O)C1=C(O)[C@]1(O)C(=O)C(C(N)=O)=C(O)C@@(N(C)C)[C@]1([H])C2
• EP官方CRS：有
• CATO货号：C4X-169924

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杂质H

• 官方名称：Minocycline Hydrochloride Dihydrate EP Impurity H
• 化学名：(4S,4aS,12aS)-4,7-bis(dimethylamino)-3,10,11,12a-tetrahydroxy-1,12-dioxo-1,4,4a,5,12,12a- hexahydrotetracene-2-carboxamide
• CAS：1346598-44-4
• SMILES：[H][C@@]12CC3=CC4=C(N(C)C)C=CC(O)=C4C(O)=C3C(=O)[C@]1(O)C(=O)C(C(N)=O)=C(O)[C@@]2([H])N(C)C
• EP官方CRS：有
• CATO货号：C4X-169918

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数据来源： 欧洲药典（EP 11.0）Minocycline专论原文 Disregard limit： 0.05 per cent Total impurities limit： maximum 3.5 per cent

米诺环素的多个杂质结构与主成分高度相似，多个相邻杂质对的分离度要求均不低于1.5，包括杂质C与H、杂质A与G、杂质F与主成分，对色谱柱的选择性和柱效提出了较高要求。EP方法采用碱去活封端的十八烷基硅烷硅胶柱，流动相添加EDTA钠和草酸铵，目的是减少金属离子络合对色谱峰形的影响，改善拖尾。由于米诺环素本身对光敏感，溶液稳定性差，试验要求全程避光，且配制后3小时内必须进样完成检测，操作过程的质量控制直接影响检测结果的准确性（推断）。

从NMPA审评视角，米诺环素属于仿制药一致性评价和ANDA申报的常见品种，杂质研究的核心核查点在于指定杂质的定量准确性和未知杂质的结构确证。根据ICH Q3A要求，超过鉴定阈值的未知杂质需要完成结构确证，EP已明确9个可检出杂质的结构，申报时可对应对已鉴定杂质进行定位，减少不必要的结构确证工作。NMPA要求，对于半合成抗生素类原料药，工艺杂质和降解产物都需要纳入质量标准控制，EP收载的所有指定杂质均需要按标准进行控制，EMA的要求与EP基本一致，未提出额外的更严格限度要求。手性杂质4-epiminocycline（杂质A）是米诺环素生产过程中最主要的手性副产物，EP限度为1.2%，是工艺控制的关键指标，申报时需要重点关注该杂质的去除工艺验证和方法学验证（推断）。

对于EP指定的7个杂质，均包含在EP系统适用性CRS中，可通过EDQM获取官方对照品，是方法学验证的首选。杂质D和I属于可检出但无需强制鉴定的其他杂质，EP未提供官方CRS，需要企业自行解决对照品来源，对照品的纯度和溯源性直接影响方法学验证的有效性。对于Other detectable impurities，若实际生产中检出水平超过报告阈值，需要按照ICH Q3A要求进行安全性评估，必要时完成结构确证。如需获取米诺环素EP全套杂质对照品（包括EP未提供官方CRS的杂质），欢迎联系CATO Research Chemicals（佳途科技）获取支持。

CATO Research Chemicals（佳途科技）提供米诺环素EP全套杂质对照品，所有产品均符合ISO 17034标准，拥有CNAS与ANAB双认证，每批次产品附带完整COA及溯源证书，可完全满足EMA、NMPA及ICH指导原则下的注册申报需求。